各種人工色素的不同前處理方法
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樣品前處理方法，高效液相色譜法的樣品前處理方法主要如下：
簡(jiǎn)單食品
①對(duì)于基質(zhì)簡(jiǎn)單的樣品，如果凍、碳酸型和酒精型飲料，可將樣品直接用水溶解，調(diào)到合適pH值后，定容過(guò)膜測(cè)定。
②對(duì)于基質(zhì)較為復(fù)雜的樣品，如果汁等，可采用聚酰胺吸附法，將加熱的樣品溶液加檸檬酸鈉調(diào)pH=6，加入聚酰胺粉攪拌，過(guò)濾，水洗可除去水溶性雜質(zhì)，甲醇、甲酸可洗去天然色素。水洗，至中性，用氨水———乙醇解吸色素，溶液蒸除氨后定容。該方法對(duì)酸性合成色素含有單偶氮結(jié)構(gòu)的日落黃、檸檬黃、胭脂紅、誘惑紅等和三苯甲烷族的亮藍(lán)、靛族的靛藍(lán)有較強(qiáng)吸附能力。
③對(duì)于含脂肪和蛋白質(zhì)較高的樣品，可以用氨水形成色素容易釋出的堿性環(huán)境，然后再用硫酸——鎢酸鈉沉淀蛋白質(zhì)。也可以先用乙醚去除油脂后，再用超聲提取。
食品甜味劑
食品甜味劑常見(jiàn)甜味劑，如糖精鈉、天冬糖、乙?；前匪徕洠ò操惷郏?、天門(mén)冬酰苯丙氨酸甲酯（甜味素）等，多采用高效液相色譜法，也有離子色譜法的報(bào)道。
甜蜜素的測(cè)定多采用氣相色譜法，顧建華等改進(jìn)了GB/T 5009.97-2003，用毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定了黃酒中的甜蜜素，色譜柱CP Sile 5CB（30m×0.25mm×0.25μm），檢測(cè)器FID，檢測(cè)室溫度200℃，進(jìn)樣口溫度200℃，載氣（高純氮）流速 1.0 mL/min，氫氣流速30 mL/min，空氣流速300 mL/min，尾吹29 mL/min，進(jìn)樣量1.0μL，分流比1/10（初始）、1/20（0min）、 1/100（0.75 min），柱箱溫度100℃保持4 min，以50℃/min 升至150℃，保持5 min，結(jié)果準(zhǔn)確。
樣品前處理方法：
①氣相色譜法測(cè)定甜蜜素，利用了亞硝酸鈉分解食品中的甜蜜素，產(chǎn)生的環(huán)己醇在酸性條件下酯化成易揮發(fā)的環(huán)己醇亞硝酸酯進(jìn)行--氣相色譜法測(cè)定，將樣品置于冰水浴中，加入亞硝酸鈉和硫酸溶液，搖勻，于冰水浴中放置一段時(shí)間，然后加入正己烷和氯化鈉，振蕩，靜止分層，得到正己烷提取液。
②對(duì)于高效液相色譜法，由于大多數(shù)甜味劑都溶于水，對(duì)于一些基質(zhì)簡(jiǎn)單的食品， 如碳酸型飲料、酒精類(lèi)（事先除去二氧化碳和乙醇）只需用水萃取或水稀釋到一定體積過(guò)膜即可。對(duì)于基質(zhì)較為復(fù)雜的樣品，如果奶型飲料、醬油，可加水超聲提取，然后再加入蛋白沉淀劑，過(guò)濾，濾液過(guò)膜即可。對(duì)于固體樣品，可加水后進(jìn)行超聲提取，定容過(guò)膜。
食品抗氧化劑目前高效液相色譜法是應(yīng)用*廣泛，可同時(shí)測(cè)定多種抗氧化劑的方法。胡曉中等用反相高效液相色譜法測(cè)定了油脂中9種酚類(lèi)抗氧化劑，采用甲醇——水——乙酸體系為流動(dòng)相，采用梯度洗脫，可在30min 內(nèi)將9種物質(zhì)完全分離并定量測(cè)定。測(cè)定線性范圍為1~ 200 mg/L（R=0.998 5~0.999 7），檢測(cè)限為2 mg
，回收率為 82.4%~98.7%，RSD為1.01%~4.74%。
食品抗氧化劑
林安清等用液相 色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)了基質(zhì)成分較為復(fù)雜的飼料中的BHA、OG、PG、TBHQ、NDGA、DG 6種抗氧化劑，檢出限為 2 mg，定性符合歐盟規(guī)定，線性、回收率、精密度均可滿(mǎn)足殘留分析要求。此外還有氣相色譜法、比色法等測(cè)定抗氧化劑方法的報(bào)道。
樣品前處理方法：
①對(duì)于高效液相色譜法，一般用正己烷、乙醚等非極性溶劑萃取，然后再用乙腈等極性溶劑進(jìn)行液——液分配，取極性溶劑進(jìn)行旋蒸濃縮定容過(guò)膜進(jìn)行測(cè)定。
②氣相色譜法，一般用己烷溶解油脂，用乙腈和乙醇的混合液萃取，除去溶劑經(jīng)硅烷化處理后進(jìn)行檢測(cè)。
食品防腐劑近年來(lái)，食品防腐劑的測(cè)定主要集中在用氣相色譜和高效液相色譜進(jìn)行多種防腐劑的同 時(shí)測(cè)定。鮑忠定等人shou次采用毛細(xì)管氣相色譜內(nèi)標(biāo)法一 次性同時(shí)測(cè)定食品中8種防腐劑。
食品防腐劑
8種食品防腐劑為丙酸、 山梨酸、脫氧乙酸、苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯和對(duì)羥基苯甲酸丁酯，檢出限分別為1.5，1.0，1.5，1.0，2.0，2.0，2.0，2.0 mg/L。
吳玉娟建立了固相萃取——高效液相色譜法測(cè)定糕點(diǎn)中脫氫乙酸、苯甲酸和山梨酸的方法，在0.02~0.15 mg/mL時(shí)具有良好的線性關(guān)系，RSD為1.0%~2.5%，回收率96.2%~102.1%，方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高，具有良好的精密度與準(zhǔn)確度。此外還有毛細(xì)管電泳法檢測(cè)食品中防腐劑含量的報(bào)道。
樣品前處理方法：
①氣相色譜法的樣品前處理：對(duì)基質(zhì)簡(jiǎn)單的食品（如食醋、果汁等），可先用鹽酸（1+1）酸化，再用乙醚提取，然后用氯化鈉酸性溶液洗滌，再過(guò)無(wú)水硫酸鈉層，水浴揮干，再用石油醚——乙醚溶解。
對(duì)基質(zhì)較為復(fù)雜的食品（如肉制品、辣醬等），目前的測(cè)定方法是先將食品中的干擾成分除去，例如用亞鐵氰--化鉀——乙酸鋅體系作為沉淀劑，氫氧化鈉——硫酸鋅作為沉淀劑，利用苯甲酸和山梨酸在堿性環(huán)境中溶于水，酸性環(huán)境中不溶于水的特點(diǎn)，在堿性條件下去除油脂，然后再用簡(jiǎn)單基質(zhì)食品相似的方法測(cè)定。
②高效液相色譜法樣品前處理：對(duì)基質(zhì)簡(jiǎn)單的食品（汽水、果汁、配制酒類(lèi)等），可將試樣用水溶解， 調(diào)pH值后定容離心。對(duì)基質(zhì)復(fù)雜的食品（如糕點(diǎn)、醬油 等），也可先將食品中的干擾成分除去，如用亞鐵氰--化鉀——乙酸鋅體系作為沉淀劑，然后再用適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ崛?。潘晴等根?jù)苯甲酸和山梨酸在酸性條件下能同水蒸氣一起蒸餾出來(lái)的特點(diǎn)，用蒸餾法進(jìn)行樣品前處理，方法簡(jiǎn)單快速，并測(cè)定了多種復(fù)雜基體食品中的苯甲酸和山梨酸。
多種添加劑同時(shí)檢測(cè)
一種食品中有時(shí)會(huì)含有多種不同種類(lèi)的食品添加劑，開(kāi)發(fā)能同時(shí)檢測(cè)多種食品添加劑的方**有力地提高檢測(cè)的效率，但由于食品的基質(zhì)較為復(fù)雜，各種添加劑的性質(zhì)差異較大，因此，目前多種食品添加劑同時(shí)檢測(cè)的報(bào)道多為用高效液相色譜法對(duì)性質(zhì)較為相近的防腐劑和甜味劑的同時(shí)檢測(cè)。
也有文獻(xiàn)報(bào)道，對(duì)樣品進(jìn)行兩步提取，然后將提取液混合同時(shí)測(cè)定多種食品添加劑。黃百芬等建立一種應(yīng)用高效液相色譜法，同時(shí)測(cè)定醬油或飲料中8種防腐劑和3種甜味劑含量的新檢測(cè)方法，用ODS-C18柱分離，20 mmol/L KH2PO4與乙腈為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度淋洗，紫外變波長(zhǎng)檢測(cè)：230，254nm，在2.50~ 162μg/mL線性范圍內(nèi)，R=0.999，回收率為97.2%~99.2%之 間，方法靈敏度高，重現(xiàn)性和選擇性好，回收率高，易于操作。
樣品前處理方法：對(duì)于高效液相色譜法，由于大多數(shù)防腐劑和甜味劑都溶于水，同時(shí)測(cè)定這2種食品添加劑時(shí)，對(duì)于基體較為簡(jiǎn)單的食品（酒、碳酸飲料等）只需用水萃取或用水稀釋到一定體積即可。對(duì)于基體較為復(fù)雜的食品（醬油、奶粉、月餅等）則需采用水或超聲萃取、加沉淀蛋白劑、過(guò)固相萃取柱等凈化技術(shù)。
二氧化碳檢測(cè)技術(shù)
隨著我國(guó)人民生活水平的不斷提高，二氧化碳作為重要的食品添加劑已走進(jìn)千家萬(wàn)戶(hù)。在食品方面的主要應(yīng)用為：碳酸飲料（可口可樂(lè)、百事可樂(lè)、啤酒等）、yan絲膨化、食品保鮮等領(lǐng)域。
據(jù)統(tǒng)計(jì)：每噸碳酸飲料對(duì)食品級(jí)二氧化碳的需求量約（0.015 ～ 0.020 ）噸，可口可樂(lè)和百事可樂(lè)公司占居國(guó)內(nèi)約37%的碳酸飲料市場(chǎng)。二氧化碳用于煙si膨化的處理，可使yan絲節(jié)省 5% ，并可提高yan絲質(zhì)量。
據(jù)統(tǒng)計(jì)每 10 萬(wàn)箱香煙，其yan絲膨化時(shí)，需 3000 噸左右二氧化碳，因此，yan草工業(yè)二氧化碳推廣應(yīng)用前景非常廣闊。在食品保鮮領(lǐng)域，以往我國(guó)采用機(jī)械冷藏等方式，冷凍貯存過(guò)程中食品因失水、風(fēng)干、氣化而不能很好的保鮮。近年來(lái)，國(guó)際上廣泛使用二氧化碳?xì)庹{(diào)、干冰速凍、液體二氧化碳的保鮮法。
該方法既能控制好氣體成分，保持適當(dāng)?shù)蜏兀顾?、蔬菜獲得良好的貯存效果。為適應(yīng)國(guó)際食品競(jìng)爭(zhēng)的需要，食品二氧化碳還作為食品冷凍保鮮和貯存糧食的殺蟲(chóng)熏蒸劑具有潛在的廣闊市場(chǎng)。
食品添加劑二氧化碳的產(chǎn)品質(zhì)量是涉及到人們的身體健康和生命**的大事，關(guān)系到我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的可持續(xù)發(fā)展和社會(huì)的穩(wěn)定。
目前美國(guó)、歐盟、日本等國(guó)家對(duì)該項(xiàng)產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)管重點(diǎn)放在立法、監(jiān)測(cè)、預(yù)警、標(biāo)準(zhǔn)制定上，特別是該領(lǐng)域相關(guān)研究機(jī)構(gòu)強(qiáng)化測(cè)量的有效性和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值傳遞及溯源功能，通過(guò)研制一系列高準(zhǔn)確度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來(lái)支持本國(guó)的科學(xué)研究和技術(shù)發(fā)展。
我國(guó)目前該標(biāo)準(zhǔn)及所涉及儀器分析定值指標(biāo)所用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)大部分均為空白，造成該標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)際飲料技術(shù)協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)以及可口可樂(lè)公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)在量值溯源與傳遞方面存在較大缺陷。
因此開(kāi)展食品添加劑二氧化碳產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)所急需的系列標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究，建立該項(xiàng)檢測(cè)國(guó)家*高計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保我國(guó)食品**檢測(cè)數(shù)據(jù)的有效性、可靠性和溯源性；研究滿(mǎn)足國(guó)際互認(rèn)要求的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值技術(shù)，分析方法以應(yīng)對(duì)食品**質(zhì)量控制和檢測(cè)、國(guó)際貿(mào)易中該項(xiàng)食品**檢測(cè)的需qiu是我們責(zé)無(wú)旁貸的責(zé)任和義務(wù)。
項(xiàng)目的完成將從根本上解決和改善我國(guó)目前食品添加劑二氧化碳分析方法及監(jiān)測(cè)方法尚不完善的現(xiàn)狀，提高檢測(cè)機(jī)構(gòu)檢測(cè)技術(shù)、檢測(cè)水平與產(chǎn)品質(zhì)量的競(jìng)爭(zhēng)力，改善我國(guó)目前尚不完善的***氣體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的空白局面，盡快地、早日地與國(guó)際計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)接軌，促進(jìn)食品行業(yè)的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展，*終達(dá)到，使我國(guó)食品行業(yè)參與國(guó)際市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)，為我國(guó)食品二氧化碳事業(yè)做出貢獻(xiàn)。
綜上所述，食品添加劑的檢測(cè)技術(shù)與方法近年來(lái)發(fā)展較為迅速，其中色譜技術(shù)已成為食品添加劑檢測(cè)的重要手段。但多數(shù)檢測(cè)方法普遍存在以下問(wèn)題：
①由于食品基質(zhì)較為復(fù)雜，幾乎各種分析檢測(cè)方法的樣品前處理都略顯繁瑣，并且大多針對(duì)特定基質(zhì)、處理方法的適用范圍相對(duì)較窄。
② 各種檢測(cè)方法多數(shù)只能測(cè)定食品添加劑中的一種或少數(shù)幾種，雖然有的檢測(cè)方法可以做到幾種添加劑同時(shí)檢測(cè)，但種類(lèi)有限。
③色譜方法是目前測(cè)定方法的主體，但其不能作為*后確證結(jié)果的方法。所以簡(jiǎn)化樣品前處理程序、重點(diǎn)開(kāi)發(fā)多種食品添加劑的同時(shí)，測(cè)定方法和GC/MS、LC/MS/MS確證*后結(jié)果方法是目前食品添加劑檢測(cè)技術(shù)研究應(yīng)解決的主要課題。
【參考文獻(xiàn)】：
[1] 李春瑛.《現(xiàn)代科學(xué)儀器》.2008-12-24
[2] 王龍飛.食品添加劑的新型高效液相檢測(cè)技術(shù)分析法.2007-2 [3] 朱莉.基于太赫茲波的食品添加劑檢測(cè)技術(shù)研究.2008
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